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Signosis SL-0032-FP 說明書

更新時間:2017-09-07      點擊次數(shù):3610

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signosis是一家專業(yè)從事生命科學(xué)領(lǐng)域細(xì)胞因子分析,轉(zhuǎn)錄因子分析等方面的生物技術(shù)公司,signosis經(jīng)過多年的發(fā)展,現(xiàn)已成為細(xì)胞因子行業(yè)品質(zhì)產(chǎn)品的象征。signosis主要產(chǎn)品涉及細(xì)胞因子分析,轉(zhuǎn)錄因子分析,細(xì)胞與細(xì)胞的凍,miRNA的研究,基因表達(dá)分析,蛋白質(zhì)相互作用分析,生物標(biāo)志物分析等領(lǐng)域。signosis致力為客戶帶來更的產(chǎn)品與服務(wù)。

 

NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell Line

NFAT熒光素酶記錄Jurkat T穩(wěn)定細(xì)胞系

Product NameCatalog #
NFAT Luciferase Reporter Jurkat T Stable Cell LineSL-0032-FP

描述: 

NFAT響應(yīng)性熒光素酶報告基因Jurkat T穩(wěn)定細(xì)胞系來自人T淋巴細(xì)胞,并在NFAT響應(yīng)元件的控制下穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶報告基因。該細(xì)胞系是用于監(jiān)測由刺激治療,強制基因表達(dá)和基因敲除引發(fā)的鈣信號通路的激活的理想細(xì)胞模型。

原理

NFAT是轉(zhuǎn)錄因子家族,在免疫反應(yīng)以及心臟,骨骼肌和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育中起重要作用。NFAT受鈣信號調(diào)節(jié)。通過磷酸酶鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的鈣激活,NFATc蛋白從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中,與其他蛋白質(zhì)配合以介導(dǎo)基因表達(dá)。NFAT的核進(jìn)口被PKA和GSK3等激酶阻斷。NFATs也涉及乳腺癌。Signosis已經(jīng)建立了已經(jīng)用NFAT-熒光素酶報告基因構(gòu)建體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的NFAT熒光素酶報道細(xì)胞系。通過熒光素酶的分析,細(xì)胞系可用于監(jiān)測由刺激,復(fù)合治療,強制基因表達(dá)或基因敲低引發(fā)的NFAT活性的細(xì)胞變化。  

通過使用含有NFAT結(jié)合位點,螢火蟲熒光素酶編碼區(qū)上游的zui小啟動子以及潮霉素表達(dá)載體,然后潮霉素選擇的pTA-NFAT-熒光素酶報道載體轉(zhuǎn)染建立細(xì)胞系。隨后對潮霉素抗性克隆進(jìn)行PMA +離子霉素誘導(dǎo)的熒光素酶活性篩選。

TF熒光素酶報告原理。  TF熒光素酶報道穩(wěn)定細(xì)胞株利用人工啟動子構(gòu)建體來驅(qū)動熒光素酶表達(dá)。啟動子區(qū)域可以由順式元件TF結(jié)合位點的多個重復(fù)序列,來自已知TF下游基因的啟動子區(qū)域的DNA片段或含有推定/已知的TF結(jié)合位點的DNA片段組成。TF可以通過細(xì)胞外刺激或通過細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)途徑激活幾種方式。一旦激活,TF易位于細(xì)胞核,并經(jīng)常與相關(guān)因子相互作用以驅(qū)動基因表達(dá)。一旦熒光素酶表達(dá),其可以在酶測定中產(chǎn)生光,并且測量的光量與TF活化的水平正相關(guān)。

 

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