biodatacorp 105997說明書

UPTT™ 試劑

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內源性血漿凝固的接觸激活

貨號：105997

產品描述

UPTT 試劑是緩沖兔腦磷脂的凍干制劑，標準化磷脂濃度≤0.1%。UPTT 試劑不含活化化合物。

預期用途

UPTT 試劑預期用于進行（非活化）體外部分凝血活酶時間 (PTT) 試驗。本試驗檢測了器械或浸提液對貧血小板或無血小板血漿 1,2 或某些血漿凝血因子缺乏的內源性凝血途徑的激活作用。1,2,3,4

原理

全血暴露于異物后，在不存在 Ca + + 的情況下發生接觸活化。4,5,6 UPTT 通過檢測血凝塊形成時間，測量通過內源性途徑參與血漿凝血活酶生成的血漿因子。7.8

應一式三份運行試驗。將暴露于試驗器械后的結果與未處理血漿和陰性對照進行比較。

注意事項

UPTT 試劑不用于人類或動物診斷試驗或程序。

在整個試劑制備、樣本采集、樣本制備和分析過程中遵守標準預防措施。9

根據實驗室政策處置銳器和生物廢物。

提供的材料

UPTT 試劑 20 x 3.0 mL

試劑儲存

凍干 UPTT 試劑-在 2-8 ℃ 下儲存，直至失效日期。復溶 UPTT 試劑在 2-8 ℃ 下儲存于密封的原始容器中時，可穩定 7 天。

需要但未提供的材料

1. 純化水，pH 5.3-7.2（蒸餾、去離子或試劑級）

2. 移液器（10.0、3.0 和 0.1 mL 容量）。

3. 氯化鈣，0.025 M (C/N 100989)

4. 檸檬酸鈉，0.11M (C/N 100994)

5. 凝血質控血漿

復溶

復溶前將小瓶加熱至室溫。

1. 輕敲小瓶，去除粘附在膠塞上的材料

2. 取下鋁密封件

3. 取下瓶塞，用 3.0 mL 純化水復溶小瓶內容物。

4. 更換塞子，倒置小瓶，充分混合內容物。使用前靜置至少 15 min，以確保內容物*再水化。

復溶后，UPTT 在 2-8 ℃ 下于密封的原始容器中儲存時可穩定 7 天。

試驗血漿的采集和制備

用于 UPTT 的供試樣本必須是采用抗凝全血制備的無血小板或貧血小板血漿。2、11、12

標本采集

應小心采血。一旦采血裝置中可見血液，松開止血帶。避免停滯、溶血、組織液污染或接觸玻璃。

真空標本采集管技術（推薦）12

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 將血液采集至含有 0.11M 枸櫞酸鈉抗凝劑的塑料真空標本采集管中

部分凝血活酶時間測定試劑（非活化）

內源性血漿凝固的接觸激活

105997

3. 輕輕顛倒試管 4-5 次，混勻標本

注：驗證使用的抗凝劑類型和濃度。顏色頂部不隨檸檬酸鹽濃度的不同而變化。

注射器技術（替代程序）13

1. 使用獲批用于實驗室標本的帶翼針采集裝置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免過度抽吸。

3. 從收集裝置中取出針頭

4. 立即輕輕將血液分配至聚丙烯管中，該管含有 1.0 mL 0.11M 檸檬酸鈉（血液與抗凝劑比例為 9:1）

5. 蓋上管蓋，輕輕顛倒 4-5 次，混勻。

6. 試驗前，將樣品在室溫下多保存兩小時。

樣品制備

血小板功能離心機

1. 將樣本放入 PDQ

2. 選擇 PFP 設置

3. 按下開始

臺式離心機：貧血小板血漿制備 12,14,15,16

1. 將標本放入離心機

2. 以 2500 xg 離心標本 15 min。

收獲樣品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除貧血小板血漿；不得干擾血沉棕黃層。

3. 將樣本轉移至塑料管和蓋上

4. 檢測前，樣品可在 (15-28 °C) 下儲存多 2 小時

• 應根據實驗室政策使用丟棄管。

• 根據標本的紅細胞壓積，調整標本體積，使血液抗凝劑比例為 9:1。紅細胞壓積需要調整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作過程中的任何時間點，請勿將全血標本或供試品暴露于玻璃容器中。14,16

• 請勿對可見溶血、黃疸或脂血樣本進行 UPTT。12

測試程序儀器

部分凝血活酶時間終點可通過手動凝血方法和大多數凝血分析儀檢測。分析儀試驗方法與用于進行活化部分凝血活酶時間試驗 (aPTT) 的方法相同。按照生產商說明進行試驗。必須使用實驗室建立的 UPTT 參考范圍。10

• 所有試驗均應重復進行三次。

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品。

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品。

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間。

手冊

1. 移取 0.1 mL 供試或對照血漿至試驗比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血漿 2 min。

2. 在 37 ℃ 下預孵育 0.025 M 氯化鈣。

3. 移取 0.1 mL UPTT 試劑，置于含有血漿的試驗比色皿中。

4. 將血漿/試劑混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案規定進行孵育。

5. 加入 0.1 mL 預孵育的氯化鈣，同時啟動計時器。

6. 記錄凝血時間

• 所有試驗均應重復進行三次

• 間接接觸血液的器械需要 1.0 g 樣品

• 直接接觸血液的器械需要 2.5g 的樣品

• 必須精確控制待評價器械與試驗血漿接觸的時間

質量控制

實驗室應遵循普遍接受的質量控制規范。應在檢測的每一天運行質控品。

1. 每個供試器械樣品必須使用兩個水平的陰性對照。

2. 每個供試器械樣品必須運行一個陽性對照

如果使用凝血分析儀進行 UPTT，則必須遵循制造商關于正確操作、質量控制和維護的說明。

各實驗室應根據確立的實驗室程序，通過進行重復研究來確定每批 UPTT 試劑和質控血漿的驗收限值。與活化部分凝血活酶時間 (APTT) 結果以與本人所用相同的方式運行比較。

每個實驗室必須確定每批 UPTT 試劑和質控血漿的參考范圍和驗收限值。當 UPTT 試劑批號改變時，需要進行 10 次交叉研究。

準確度、精密度和重現性

正常血漿和質控品水平 1、2 和 3 的 CV 應小于 5%。

UPTT 檢測結果的精密度和準確度可能受到許多因素的影響。顯著的方案和實驗室間差異來自用于測量凝血終點的凝血系統的數量。5,15 可能影響檢測結果的實驗室內變量包括用于試劑復溶的純化水的 pH 值、移液技術、孵育時間和溫度、試劑污染或試劑批號變化。定期進行的 18,19 次定期質量控制檢測將有助于識別可能發生的任何變化并導致錯誤的檢測結果。

結果

UPTT 試驗結果應報告為凝血終點（秒）。應一式三份運行供試品和對照品，并在將其與實驗室確立的參考范圍進行比較之前對結果取平均值。14,16,17,22

結果中應包括 p 值，作為檢驗有效性的指標。

在統計學上比較未暴露血漿的平均結果與暴露于器械的血漿的結果。為了通過，器械統計必須具有≥0.05 的 p 值。

預期值

正常血漿：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：當在光電分析儀上使用正常質控品血漿進行測試時，UPTT 結果將大于 60 秒。接觸激活將縮短該時間。由于分析儀和方案之間的操作差異，每個實驗室必須建立 UPTT 的參考范圍。實驗方案、樣品制備和終點檢測方法可能會影響試驗結果。

局限性

1. 溶血、黃疸或脂血血漿可能產生錯誤的檢測結果。

a. 會影響檢測結果的溶血、黃疸或脂血濃度取決于分析儀。17,21

2. 冷凍血漿樣本可能導致錯誤的檢測結果。

• 血液與抗凝劑的比例不正確可能導致虛假的檢測結果。對于紅細胞壓積值高于 53% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例降低，對于紅細胞壓積值低于 25% 的樣本，添加到血液中的抗凝劑量必須成比例增加。2,7

參考文獻

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3. Braybrook JH，編輯，醫療器械和材料的生物相容性評估。J > Wiley&Sons.英國西蘇塞克斯。1997 年

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6. Gad,MC.藥品和醫療器械的安全性評價：監管指南。DOI:10,3007/978-1-4419-7449-5. Springer Science and Business Media.紐約州紐約市。2010 年

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22. Westgard,JO 和 Hunt,MR。方法比較研究中常用統計檢驗的使用和解釋。臨床化學 19:49-57/1973。

產品可用性

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