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多功能DNA/siRNA 轉(zhuǎn)染試劑說明書

更新時(shí)間:2021-06-07      點(diǎn)擊次數(shù):13397

 

polyplus-transfection 多功能 DNA/siRNA 轉(zhuǎn)染試劑說明書

jetPRIME ®

  •  高DNA轉(zhuǎn)染效率
  •  核酸含量低
  •  細(xì)胞活力
  •  一種用于 DNA 和/或 siRNA 轉(zhuǎn)染的試劑
  •  性價(jià)比高
  •  

規(guī)格

試劑

jetPRIME ®

分子交付

DNA, siRNA, DNA & siRNA

應(yīng)用

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
基因組編輯
病毒生產(chǎn)
siRNA 轉(zhuǎn)染
不同核酸的共同遞送

細(xì)胞類型

在血清存在下生長的貼壁細(xì)胞系

轉(zhuǎn)染次數(shù)

1.5 ml jetPRIME ®轉(zhuǎn)染試劑足以在 24 孔板中進(jìn)行多達(dá) 1500 次轉(zhuǎn)染或在 6 孔板中進(jìn)行 375 次轉(zhuǎn)染

貯存

5°C ± 3°C,適當(dāng)儲(chǔ)存可穩(wěn)定至少一年

提供

jetPRIME 緩沖區(qū)


概括

 

jetPRIME® 是一種功能強(qiáng)大且用途廣泛的 DNA 和 siRNA 轉(zhuǎn)染試劑,適用于日常實(shí)驗(yàn),可產(chǎn)生高效可靠的科學(xué)結(jié)果。jetPRIME® 可確保在各種貼壁細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)高 DNA轉(zhuǎn)染效率和出色的基因沉默。jetPRIME ® 也是DNA/siRNA 共轉(zhuǎn)染或多種質(zhì)粒共遞送的理想選擇。此外,我們的 jetPRIME® 試劑對(duì)細(xì)胞非常溫和,因?yàn)樗谵D(zhuǎn)染過程中需要少量的試劑和核酸。

訂購信息

參考編號(hào) 試劑量 緩沖量
114-01 0.1毫升 5毫升
114-07 0.75 毫升 60毫升
114-15 1.5 毫升 2 x 60 毫升
114-75 5 x 1.5 毫升 10 x 60 毫升
712-60 X 60毫升

 

1.5 ml 足以在 6 孔板中進(jìn)行約 375 次轉(zhuǎn)染

 

描述

轉(zhuǎn)染效率

jetPRIME ®是一種適用于日常實(shí)驗(yàn)強(qiáng)大轉(zhuǎn)染試劑它導(dǎo)致各種來源的轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞系以及原代細(xì)胞的比例異常高。

 與競爭對(duì)手的試劑相比,使用 jetPRIME ®試劑獲得了 70% 至 90% 的轉(zhuǎn)染效率(圖 1 和圖 2)。

jetPRIME - 與 Lipofectamine 2000 對(duì)比

圖 1:jetPRIME 與其主要競爭對(duì)手的轉(zhuǎn)染效率比較。在 24 孔板中轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí),通過 FACS 分析在各種細(xì)胞系中評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對(duì) Lipofectamine ® 2000 和 jetPRIME ®的推薦使用條件

jetPRIME - 與 Lipofectamine 3000 對(duì)比

圖 2:jetPRIME ®與 Lipofectamine ® 3000 的轉(zhuǎn)染效率比較在 96 孔板或 24 孔板中轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí),通過 FACS 分析在各種細(xì)胞系中評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商對(duì) lipofectamine ® 3000 和 jetPRIME ®的推薦使用條件

成本效益:更少的 DNA 和更少的試劑

jetPRIME ® 是一種強(qiáng)大的體外轉(zhuǎn)染試劑,需要少量試劑和質(zhì)粒 DNA,因此使用起來非常經(jīng)濟(jì)高效 (表 1)。

jetPRIME - 推薦條件

表 1:推薦使用條件。根據(jù)制造商的建議,用于轉(zhuǎn)染的 6 孔板中每孔 DNA 和試劑(jetPRIME ®和競爭對(duì)手)的數(shù)量。

除了降低成本之外,使用更少的 DNA 還可以最大限度地減少轉(zhuǎn)染引發(fā)的不利細(xì)胞毒性作用。因此,jetPRIME ® 是實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率和出色細(xì)胞活力的試劑

更好的細(xì)胞活力

jetPRIME ® 在轉(zhuǎn)染過程中對(duì)細(xì)胞極其溫和,從而提高細(xì)胞活力并改善轉(zhuǎn)染結(jié)果。用 jetPRIME ®轉(zhuǎn)染的細(xì)胞 是健康的,而競爭者則觀察到主要的細(xì)胞毒性(圖 3)。

jetPRIME - 轉(zhuǎn)染細(xì)胞與試劑 L2K 和 L3K 相比

圖 3:轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí)的細(xì)胞活力。根據(jù)制造商對(duì)每種試劑的建議,在轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí)對(duì) HeLa 細(xì)胞進(jìn)行相差顯微鏡檢查。

易于使用的協(xié)議

jetPRIME ® 是一種易于使用的轉(zhuǎn)染試劑(圖 4):

  • 快速且輕松地?cái)U(kuò)大和縮小規(guī)模
  • 與血清和抗生素兼容

jetPRIME - 協(xié)議

圖 4:jetPRIME ®協(xié)議。方便的 DNA、siRNA 和 DNA 和 siRNA 共轉(zhuǎn)染方案。

在我們的博客部分查看我們的 專家提示,以加快 DNA 轉(zhuǎn)染。

 

 

應(yīng)用

質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

jetPRIME ®導(dǎo)致各種來源的轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞系以及原代細(xì)胞的比例非常高(表 1)。

jetPRIME - 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染

表 1:使用 jetPRIME ®的各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí)通過 FACS 分析確定 GFP 陽性細(xì)胞的百分比。

質(zhì)粒是在細(xì)菌中常見的環(huán)狀 DNA 小分子。質(zhì)粒與染色體 DNA 分開存在和復(fù)制,并且在細(xì)菌中它們通常攜帶有利于細(xì)菌生存的基因。質(zhì)粒可被有意引入所需細(xì)胞并用于在特定細(xì)胞系中過表達(dá)感興趣的基因。此過程稱為 DNA 轉(zhuǎn)染,是研究基因功能或目標(biāo)蛋白質(zhì)的常用方法。

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基因組編輯

CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的使用最近成為一種在特定位點(diǎn)修改細(xì)胞基因組的非常方便的方法。它涉及將 (a) 一個(gè)或多個(gè)編碼 Cas9、特定 gRNA 和最終插入序列的質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,或 (b) 一個(gè)或兩個(gè)質(zhì)粒和一個(gè) RNA 分子(gRNA)的混合物.

可用應(yīng)用說明: 使用 jetPRIME ® 進(jìn)行CRISPR/Cas9 介導(dǎo)的基因破壞

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siRNA轉(zhuǎn)染

jetPRIME ® 導(dǎo)致多種細(xì)胞系中內(nèi)源基因表達(dá)的抑制率超過 90%。例如,jetPRIME ®介導(dǎo)的HeLa 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與10 nM siRNA 雙鏈體靶向HeLa 細(xì)胞中的內(nèi)源性核層蛋白A/C 顯著降低了核纖層蛋白A/C 基因的表達(dá)水平(圖1)。

jetPRIME - siRNA

圖 1:使用 jetPRIME ® 的內(nèi)源性 lamin A/C 靜音用 10 nM 的 21-mer 核纖層蛋白 A/C siRNA 轉(zhuǎn)染 HeLa 細(xì)胞。48 小時(shí)后,使用抗 lamin A/C 抗體通過免疫熒光顯微鏡評(píng)估 lamin A/C 沉默。

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不同核酸的共轉(zhuǎn)染

jetPRIME ® 非常適用于 DNA 和 siRNA/miRNA共轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)或多種 DNA 質(zhì)粒的共遞送。

我們使用 jetPRIME ®進(jìn)行了 DNA 和 siRNA 遞送,在各種細(xì)胞系中觀察到高效的基因沉默且毒性極低。使用 10 nM siRNA 在貼壁細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了超過 90% 的沉默(圖 2)。

jetPRIME - 共轉(zhuǎn)染沉默

圖 2:使用 jetPRIME ® 共轉(zhuǎn)染 DNA 和 siRNA 后,幾種細(xì)胞系中的外源熒光素酶沉默在 6 孔板中,每孔使用 400 ng p4CMV-Luc 和 10 nM 熒光素酶 siRNA 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

 

 

質(zhì)量

每批 jetPRIME ®試劑都通過用表達(dá) GFP 的質(zhì)粒對(duì) HeLa 細(xì)胞進(jìn)行 DNA 轉(zhuǎn)染進(jìn)行內(nèi)部測試,并且每瓶試劑都提供分析證書。

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