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細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒(MTT法)

更新時(shí)間:2012-01-14      點(diǎn)擊次數(shù):5858

細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒(MTT法)

產(chǎn)品編號 包裝 價(jià)格
130005-M 300T 185.00
130005-M1 500T 328.00
130005-M2 1000T 572.00
產(chǎn)品簡介
  噻唑蘭(Methylthiazoletetrazolium, MTT)是一種可接受氫離子的淡黃色唑氮鹽染料,被活細(xì)胞線粒體呼吸鏈中的琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C還原,使tetrazolium環(huán)開裂,生成水不溶的深紫色結(jié)晶產(chǎn)物甲簪(formazan)。死細(xì)胞因喪失琥珀酸脫氫酶活性,因此甲簪的生成量僅與活細(xì)胞數(shù)目成正比。在特定溶劑存在的情況下,甲簪可以被*溶解,借助酶標(biāo)儀測定570nm波長附近的吸光度,可推算出活細(xì)胞的數(shù)量或細(xì)胞存活率。細(xì)胞增殖速度越快,則甲簪生成的量越多,吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則甲簪生成的量越少,吸光度越低。由于操作簡便,成本低,不污染環(huán)境,克服了傳統(tǒng)的同位素?fù)饺牖蜥尫艑?shí)驗(yàn)等操作復(fù)雜,成本高,對儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室條件要求高,難于防護(hù)等因素,而被廣泛地用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。
    賽馳生物開發(fā)生產(chǎn)的細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒(Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit) 以MTT為指示劑,在經(jīng)典操作方法的基礎(chǔ)上,采用了*的甲簪溶解液,可以直接溶解甲簪,而無需離心去除原有的培養(yǎng)液,故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作誤差,具有本底低,靈敏度高,線性范圍寬,操作簡便等特點(diǎn)。 
包裝清單      

細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測試劑盒
130005-M
130005-M1
130005-M2
MTT染色液
6ml
10ml
10ml×2
Formazan溶解液
30ml
50ml
100ml
說明書
1 份

保存條件 
    MTT溶液-20℃保存,一年有效;Formazan溶解液室溫或-20℃保存。 
使用說明 
    1. 細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn),一般可在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行。
    2. 每孔加入100微升細(xì)胞懸液。細(xì)胞的數(shù)量取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)時(shí)間。增殖實(shí)驗(yàn)每孔通常加入103個以上數(shù)量的細(xì)胞;細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔至少加入5x103個或以上數(shù)量的細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等因素確定)。
    3. 接種的細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)需要,送入細(xì)胞培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。增殖實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升特定的藥物或生長因子進(jìn)行刺激。細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升抑制因子或細(xì)胞毒藥物;
    4.培養(yǎng)結(jié)束后,每孔加入20微升MTT溶液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育3-6小時(shí);  
    5.孵育結(jié)束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育,直至在鏡下觀察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時(shí)左右,紫色結(jié)晶會全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少,溶解的時(shí)間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多,溶解的時(shí)間會略長。 
    6. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片, 560-600nm范圍的濾光片均可使用。
 

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